AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體的實(shí)驗(yàn)步驟

AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體的實(shí)驗(yàn)步驟:

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

保存條件：不使用時取試劑盒中一抗保存-20℃，其他均保存 2-8 ℃

試劑盒特點(diǎn)：利用LAB-SA第二代技術(shù)生產(chǎn)的免疫組化檢測試劑，特點(diǎn)是高靈敏度，特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰等、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育時間短，適用于冷凍切片、石蠟切片及固定的細(xì)胞涂片?？捎糜跈z測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗原。