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    犬環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

    更新時(shí)間:2021-09-02      點(diǎn)擊次數(shù):489

    犬環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

    2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

    4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    7. 溫育:操作同3。

    8. 洗滌:操作同5。

    9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

    系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體

    磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體

    磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體

    接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體

    磷酸化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體

    膜粘連蛋白7抗體

    3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15抗體

    載脂蛋白B受體抗體

    三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

    載脂蛋白B抗體

    花生四烯酸15脂氧合酶2抗體

    載脂蛋白C4抗體

    低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體

    原始廣泛存在蛋白1抗體

    錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體

    α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1

    血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體

    膜粘連蛋白2受體抗體

    血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體

    拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體


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