當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > PCR試劑盒 > PCR檢測(cè)試劑盒 > 50次牛細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家
簡(jiǎn)要描述:牛細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:異槲皮苷;Isoquercitrin CAS 21637-25-2 * 規(guī)格: 20mg異嗪皮啶;Isofraxidin CAS 486-21-5? * 規(guī)格: 20mg香紫蘇醇 ;Sclareol CAS 515-03-7 * 規(guī)格: 20mg喜樹(shù)堿;Camptothecine CAS * 規(guī)格:
詳細(xì)介紹
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家 | Bovine Parvovirus (BPV)PCR | BK-P8917 |
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
硬脂酸甲酯;Methyl Stearat CAS 112-61-8 * 規(guī)格: 50mg
原百部堿;protostemonine CAS 27495-40-5 * 規(guī)格: 20mg
異槲皮苷;Isoquercitrin CAS 21637-25-2 * 規(guī)格: 20mg
異嗪皮啶;Isofraxidin CAS 486-21-5? * 規(guī)格: 20mg
香紫蘇醇 ;Sclareol CAS 515-03-7 * 規(guī)格: 20mg
喜樹(shù)堿;Camptothecine CAS * 規(guī)格: 20mg
脫氫堿;Dehydroglauci CAS * 規(guī)格: 20mg
酸棗仁皂苷B1;Jujuboside B CAS 68144-21-8 * 規(guī)格: 20mg
雙草酸鹽;4-Ami-4-Me CAS 625-04-7 * 規(guī)格: 20mg
天然;Borneol CAS 5 * 規(guī)格: 200mg
日蟾它靈;Gamabufalin CAS * 規(guī)格: 20mg
七葉樹(shù)皂苷B;Aesculuside B CAS 26339-92-4 * 規(guī)格: 20mg
5-羥;5-Hydroxymet CAS 67-47-0 * 規(guī)格: 20mg
蒲公英賽醇;Taraxerol CAS 127-22-0 * 規(guī)格: 20mg
麥芽糖;Maltose CAS 69-79-4 * 規(guī)格: 20mg
牛細(xì)小病毒PCR檢測(cè)試劑盒廠家水解酪蛋白(酸)/酸水解酪蛋白/酸水解干酪素/Casein acid hydrolysateBR250/1000克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
紫褐小單孢菌 Micromonospora violaceofusca大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基
異常漢遜酵母 Hansenula anomala人結(jié)直腸腺細(xì)胞
屎腸球菌 Enterococcus faecium嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
酵母蛋白胨培養(yǎng)基1萬(wàn)毫升/袋國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基/Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng),坂崎桿菌顯藍(lán)色,其他腸桿菌顯無(wú)色1升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
產(chǎn)品咨詢
聯(lián)系我們
上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號(hào)24棟 技術(shù)支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼