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簡要描述:桔青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格上海帛科生物相關產(chǎn)品:膠體金標記的兔抗親和素 2mlRabbit Anti-Avidin/GoldCy3標記的兔抗雞IgG 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/Cy3堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗羊IgM 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/AP
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
桔青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格 | Penicillium citrinumPCR | BK-P9543 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
鵝3β羥基類固醇脫氫酶(3β-HSD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織蛋白去乙?;?/font>(HD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠總抗氧化能力( T-AOC) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠總膽固醇(TC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠轉鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
大鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒
桔青霉PCR檢測試劑盒規(guī)格性激素結合球蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SHBG
內(nèi)臟脂肪組織源性絲氨酸蛋白酶抑制蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文名稱:SERPINA12
Smad7抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:Smad7 + Smad6
長鏈脂肪酸輔酶A連接酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文名稱:SLC27A2
驢抗豚鼠IgG抗血清 1mlDonkey anti-Gpig IgG whole serum
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗犬IgM抗體 0.1mlDog IgM/AP
PE標記的兔抗羊IgG 0.1mlRabbit Anti-Goat IgG/PE
生物素標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1mlRabbit anti-MG IgG/Bio
PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM 0.1mlMouse Anti-Rabbit IgM/PE-Cy5.5
生物素標記的羊抗豚鼠IgG 0.1mlGoat Anti-Guinea pig IgG/Bio
PE-Cy7標記的羊抗人IgM 0.1mlGoat Anti-human IgM/PE-Cy7
堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗兔IgM 0.1mlMouse Anti-Rabbit IgM/AP
膠體金標記的兔抗親和素 2mlRabbit Anti-Avidin/Gold
Cy3標記的兔抗雞IgG 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/Cy3
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗羊IgM 0.1mlRabbit Anti-Goat IgM/AP
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