吲哚乙酸氧化酶測試盒微量法

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：吲哚乙酸氧化酶測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

產(chǎn)品貨號：BK-01S7020

產(chǎn)品分類：植物激素系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

瓊脂J Agar medium J (Deoxycholate citrate agar) 250g

1瓶 HCC94[HCC941122]細(xì)胞株 HCC94[HCC941122] 低溫運(yùn)輸和保存

LST發(fā)酵管（含小倒管） LST 10ml*20支/包

500U Tma 核酸內(nèi)切 III Tma Endonuclease III -20℃保存

志賀氏菌顯色  1000ml

250mg 赤 Gibberellic Acid (GA3) 室溫干燥保存

50T 花生PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

60µL 驢抗山羊IgG，堿性標(biāo)記 Donkey Anti-Goat IgG,AP Conjugate  -20℃保存

2 ug pBiFC-bJunVN55(I152L) pBiFC-bJunVN55(I152L) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50mL DNA洗脫液  

2 ug pFAST II pFAST II 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

吲哚乙酸氧化酶測試盒微量法phospho-MAP4(Ser1046)  磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml

DcR1  瘤壞死因子配體超家族成員10C 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

CD166  活化白細(xì)胞粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human sIgA/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml

TRF2  端粒結(jié)合蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Biotin/Cy7  Cy7標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

PFKFB2  果糖-2,6-二磷酸心肌抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHL14  Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)  磷酸化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體 規(guī)格: 0.1ml

ATG13  自噬相關(guān)蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml

GIMAP6  GTPIMAP家族成員6抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。