考馬斯亮藍法蛋白含量測定

儀器：
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

蛋白酶抑制劑Cocktail（片劑）5×1ml2-Carbamoyl-hydroxy,4-naphthoquinone364

蛋白酶抑制劑混合物（0×，哺乳動物樣品提取用）1ml/5×1ml 2-Benzylsuccinic acid39726

蛋白酶抑制劑混合物（0×，通用型）1ml/5×1ml 2-Benzylaminopyridine693572-苯氨基吡啶

蛋白酶抑制劑混合物（0×，細(xì)菌抽提用）1ml/5×1ml 2-Benzylacrylic acid56699

蛋白酶抑制劑混合物（0×，真菌或酵母抽提用）1ml/5×1ml 2-Benzyl-(dimethylamino)'-morpholinobutyrophenone11931322-芐基-(二氨基)'-嗎啉基苯基丁酮
P 物質(zhì) (Substance P)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Anthraflavic acid  中文名：二羥蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%

OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  3-Methoxyfuran  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%

N-三(羥)甘酸   500g  3-Amino-5-phenylpyrazole  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3  度：98.0%

NeomycinSulfate   25g                 Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4 

N-Dodecyl-β-Maltoside  Zidovudine  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4
中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2   英文名稱：   neuophilicgranulocyte chemokines Protein 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GCP-2  Androstenediol  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2 

中性粒細(xì)胞趨化蛋白 -2(GCP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Nitrendipine  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6 

中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)性載脂蛋白   英文名稱：   Neuophil gelatinase-associated lipocalin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   NGAL  3-Hydroxychimaphilin  中文名：3-羥基梅笠草素  分子式：C12H10O3  度：98.0%

中性粒細(xì)胞活化肽 (NAP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Testosterone isocaproate  中文名：異己酸  分子式：C25H38O3  度：98.0%

中性粒細(xì)胞防御素   英文名稱：   Neuophil Peptide-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HNP-1  Testosterone undecanoate  中文名：十一酸  分子式：C30H48O3  度：98.0%
考馬斯亮藍法蛋白含量測定Humanasialoglycoproteieceptor,ASGPR 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 太子參環(huán)肽B HPLC≥98% 20mg

HumanAspaateaminoansferase,AST 人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 檀香醇 UV≥98% 20mg

HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPTELISA試劑盒人天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 桃葉珊瑚苷 HPLC≥98% 20mg

Humanasymmeicaldimethylarginine,ADMAELISA試劑盒人不對稱二精氨酸(ADMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 特女貞苷 HPLC≥98% 20mg

HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISA試劑盒人擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 藤黃酸 HPLC≥98% 20mg

HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISA試劑盒人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 惕格酸 HPLC≥98% 20mg

HumanAttacin 人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 天麻素 HPLC≥98% 20mg

humanAzidothymidine,AZT 人疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 甜菜堿 HPLC≥98% 20mg

Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人細(xì)菌(BV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甜茶苷 HPLC≥98% 20mg

Humanbasicfetoprotein,BFPELISA試劑盒人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甜橙黃酮 HPLC≥98% 20mg

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