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    α葡萄糖苷酶(α GC)測試盒可見分光光度

    簡要描述:α葡萄糖苷酶(α GC)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:OF生化管 英文名稱: 產品規(guī)格:20支 ONPG 英文名稱: 產品規(guī)格:20支 賴脫羧肉湯 英文名稱: 產品規(guī)格:20支 尿素 英文名稱: 產品規(guī)格:20支

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-25
    • 訪  問  量:618

    詳細介紹

    特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產品名稱:α葡萄糖苷酶(α  GC)測試盒可見分光光度法

    產品規(guī)格:50管/24樣

    檢測方法:可見分光光度法

    產品貨號:BK-01S6744

    產品分類:糖代謝系列
    商品介紹:

    測定意義:

    α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖,不僅與細胞壁的松弛或加固有關,而且與細胞識別和一些信號分子產生密切相關。

    測定原理:

    α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。

    自備用品:

    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    100mL CAPS Buffer,0.5M,pH11.0  CAPS Buffer,0.5M,pH11.0  常溫保存

    100g 瓊脂糖 Agarose 常溫

    2 ug pHR pHR 低溫運輸,-20℃保存

    瓊脂培養(yǎng)基L Agar medium L 250g

    1瓶 HGC-27細胞株 HGC-27 低溫運輸和保存

    100次 真菌種屬鑒定 PCR Mix 4(SSU) Fungal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

    2 ug pBR322 pBR322 低溫運輸,-20℃保存

    胰胨大豆瓊脂斜面(TSA) Tryptic Soy Agar 250g

    100g 阿拉伯樹膠粉 Gum Acacia 室溫保存

    50T 金黃菌耐藥基因PCR測定試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

    100次 細胞計數液 (Vi-CELL儀專用) Cell Counting Reagent 4℃保存

    α葡萄糖苷酶(α  GC)測試盒可見分光光度法FAM76A  FAM76A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    GLUR4  谷受體4抗體 規(guī)格: 0.1ml

    REC8  減數分裂重組蛋白家族REC8抗體 規(guī)格: 0.2ml

    EGR2  早期生反應蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    RNF86  環(huán)指蛋白86 規(guī)格: 0.2ml

    ERAS/HRAS2  胚胎干細胞RAS蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-NFKBIA(Ser32/36)  磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗體 規(guī)格: 0.1ml

    CDC34/UBC3  細胞周期調控因子34 規(guī)格: 0.1ml

    Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

    Protein S/PROS  蛋白S抗體 規(guī)格: 0.2ml

    CCDC160  卷曲螺旋結構域蛋白160抗體 規(guī)格: 0.2ml

    TPX2  微管相關同源蛋白TPX2抗體 規(guī)格: 0.2ml 

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

     


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