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    淀粉脫分支酶(DBE)測試盒微量法

    簡要描述:淀粉脫分支酶(DBE)測試盒微量法公司正在出售的產品:改良HC瓊脂添加劑 英文名稱: 產品規(guī)格:1ml*5 改良HC瓊脂 英文名稱:HC Agar,Modified 產品規(guī)格:250g 雙料乳糖膽鹽(含中和劑)培養(yǎng)基 英文名稱:Double Lactose Bile Medium 產品規(guī)格:250g 乳糖膽鹽培養(yǎng)基 英文名稱:Lactose Bile Medium 產品規(guī)格:250g

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-26
    • 訪  問  量:617

    詳細介紹

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

    產品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    淀粉脫分支酶(DBE)測試盒微量法

    100管/48樣

    微量法

    BK-01S6691

    商品介紹:

    測定意義:

    DBE能夠專一性地裂解支鏈淀粉的α-1,6糖苷鍵,產生線性的葡萄糖鏈,在調整支鏈淀粉分子的鏈長方面有重要的作用。

    測定原理

    采用3,5-二硝基水楊酸法測定DBE催化支鏈淀粉產生的還原糖,通過測定還原糖含量的變化來計算DBE活性。

    需自備的的儀器和用品

    可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    實驗結果判斷我有妙招:

    1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

     

    操作步驟:

    1. 樣品的準備:

    a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續(xù)檢測。

    e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

    2. 試劑盒的準備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

    b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

    c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    2 ug pLenti4/V5-DEST pLenti4/V5-DEST 低溫運輸,-20℃保存

    乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基(高PH值) Lactose Bile Medium 250g

    1瓶 NBTF細胞株 NBTF 低溫運輸和保存

    甲基紅指示劑盒 Methyl Red Indicator Box 5ml*2

    1g 二腺 ADP Na2 -20℃保存

    0.9%無菌氯化鈉溶液管  9ml*20支/包

    100µL 小鼠RFP標簽單抗 Anti RFP-Tag Mouse MAb -20℃保存

    2 ug pSY1 pSY1 低溫運輸,-20℃保存

    100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.0  常溫

    2 ug pDC316 pDC316 低溫運輸,-20℃保存

    卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎 Egg Yolk Agar Base 250g

    淀粉脫分支酶(DBE)測試盒微量法SLC29A4  腦質膜單胺轉運蛋白PMAT抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Apoptosis enhancing nuclease  細胞凋亡增強核酸抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Protective protein  組織蛋白A抗體 規(guī)格: 0.1ml

    HER2/NEU/ErbB2  HER2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    DAPK3/ZIP Kinase  凋亡相關蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

    CCDC98  卷曲螺旋結構域蛋白98抗體 規(guī)格: 0.2ml

    PANK3  泛酸激3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    SCN3B  電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    MMP-8  基質金屬蛋白-8抗體 規(guī)格: 0.1mlFibrinopeptide B  纖維蛋白肽B抗體(纖肽B) 規(guī)格: 0.2ml

    NFKB p65  細胞核因子/k基因結合核因子抗體 規(guī)格: 0.1mlPeroxiredoxin 2/PRXII  硫氧還蛋白過氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體 0.1ml

    Signal recognition particle  信號識別顆粒抗體 規(guī)格: 0.1mlGDPD3  甘油磷酸二酯磷酸結構域3抗體 規(guī)格: 0.2ml

     


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