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簡(jiǎn)要描述:可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:遠(yuǎn)藤氏瓊脂 英文名稱(chēng):Endo Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Lactose Peptone Semisolid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 胰蛋白胨水培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Trytone Water medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基(B法) 英文名稱(chēng):Power - nitrate
詳細(xì)介紹
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6685 |
商品介紹:
測(cè)定意義: SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長(zhǎng),主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。 測(cè)定原理 SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP,在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比,340nm下測(cè)定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
25mL Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X) Laemmli’s Buffer with Pyronin Y (reducing,4X) 常溫保存
30次 石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒 FFPE WGA Kit -20℃保存
2 ug pAD-TRAF pAD-TRAF 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
可溶性淀粉瓊脂 Soluble Starch Agar 250g
1瓶 OP9細(xì)胞株 OP9 低溫運(yùn)輸和保存
MI瓊脂培養(yǎng)基平板 9cm*10個(gè)
5g 溴藍(lán) Bromophenol Blue 室溫干燥保存
125mL Triton Lysis Buffer,2X Triton Lysis Buffer,2X 常溫保存
5mL 抑氨肽,5mg/mL Bestatin Solution -20℃保存
2 ug pUB6/V5 His A pUB6/V5 His A 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10次 Southern級(jí)細(xì)菌(G-)DNAout
可溶性淀粉合成酶(SSS)測(cè)試盒微量法Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗體 規(guī)格: 0.1mlTNFC/lymphotoxin Beta 瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體 規(guī)格: 0.2ml
ECRG4/C2orf40 食道相關(guān)基因4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSPRR1a/Cornifin A 角質(zhì)蛋白α抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-RGS19(Ser24) 磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1mlLIR-8/CD85c/LILRB5 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8抗體 規(guī)格: 0.2ml
XRCC4 X射線(xiàn)修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlMAGEA12 黑色素瘤相關(guān)抗原12抗體 規(guī)格: 0.2ml
PCNA-Proliferation Marker 增細(xì)胞核抗原抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgG/Bio 標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml
ING1/p33 生抑制因子基因1抗體 規(guī)格: 0.1mlGFAP delta 膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAPδ抗體 規(guī)格: 0.2ml
GRK5 G蛋白偶聯(lián)受體激5抗體 規(guī)格: 0.2mlCXCL7/NAP-2/PPBP 小板趨化因子7蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
BRCAA1/RBBP1L1 相關(guān)抗原BRCAA1抗體 規(guī)格: 0.2mlCGP-39/YKL-40 軟骨糖蛋白39抗體 規(guī)格: 0.1ml
CAMTA1 鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-Paxillin(Tyr31) 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格: 0.1ml
NHLRC3 非霍奇金重復(fù)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-1 Beta/IL-1B 白介素1β抗體 IL-1β 規(guī)格: 0.1ml
SARS S-protein 抗表面S蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlMCM2 微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MGMT O6甲基DNA甲基轉(zhuǎn)移抗體 規(guī)格: 0.2mlLH 人促黃體生成素抗體 規(guī)格: 0.1ml
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