Western Blot檢測試劑盒

儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣：可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 Jurkat,Clone E6-1(T 細(xì)胞白血病細(xì)胞)1酸西他列汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sitagliptin Phosphate

小鼠成纖維細(xì)胞;φ2西他列汀N-硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sitagliptin N-Sulfate

CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1壯觀霉素鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Spectinomycin

ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 外消旋噻嗎洛爾-d5 馬來酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口rac Timolol-d5 Maleate
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5β-淀粉酶(酶活5萬粉末)質(zhì)量規(guī)格：BR,酶活5萬,粉末beta-Amylase

CLPS Others Human 人 CLPS / Colipase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DNA酶,脫氧核糖核酸酶Ⅰ質(zhì)量規(guī)格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)Deoxyribonuclease

CL-0185PC-3(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRNicotinamide

Raji，人Butt's瘤細(xì)胞 人晶體上皮細(xì)胞系，SRA01/04細(xì)胞 C6(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)維生素B3(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nicotinamide

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-15 [HCT15]醋酸環(huán)丙孕酮,醋酸環(huán)丙氯地孕酮質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCyproterone acetate
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Lipase(Candida)脂肪水解酶25克BR，類型F-300，130u/mg

人膀胱平滑肌細(xì)胞HBdSMC酯酶 Sulfatase from Helix pomatia 9016-17-5 5KU 通用試劑

CAMK2B Others Human 人 CAMK2B / CaMKII-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 加醋銨 99% Formic ccid 瞇達(dá)

牛陀螺狀細(xì)胞;BT1-奈乙酸鉀，英文名或英文縮寫：NAA-K，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：100毫克

CHL/IU[CHL-11]細(xì)胞，中國倉鼠肺細(xì)胞 人胰腺癌細(xì)胞,PANC-1細(xì)胞 CM-R085大鼠表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL191-07-1暈本;六本并本Coronene
Western Blot檢測試劑盒人食道上皮細(xì)胞總RNAHEEpiC NA亮綠SF(淡黃)Light Green SF Yellowish質(zhì)量規(guī)格：BS

TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 健那綠BJanus Green B質(zhì)量規(guī)格：BS

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21酸性綠3Guinea Green B質(zhì)量規(guī)格：BS，進(jìn)口原裝

PC-2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-4細(xì)胞 小鼠色素瘤瘤株;B16酸性綠 50 Lissamine™ Green B質(zhì)量規(guī)格：BS,進(jìn)口原裝

Hut-102(人皮膚T瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2酸性綠AAcid Green A質(zhì)量規(guī)格：BS,>97%,進(jìn)口分裝

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