Tris-HCl緩沖液不同pH及摩爾濃度

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），人ACTH(1-39),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

恒河猴腎細胞;LLC-MK2促腎上腺皮質(zhì)激素（1-39），大鼠ACTH (1-39), rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NCI-H838細胞，人非小細胞肺癌細胞 大鼠正常肝細胞,BRL-3A細胞 CM-R055大鼠卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL促腎上腺皮質(zhì)激素（18-39），人ACTH (18-39), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2促腎上腺皮質(zhì)激素（4-10），人ACTH (4-10), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml腎臟髓質(zhì)肽（22-52），人Adrenomedullin (22-52),human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
16HBE(人支氣管上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸林可霉素（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測定Lincomycin HCl

HTSMC-c 人類氣管平滑肌細胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml三代甲狀腺素鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>97.0%,BRLiothyronine

大隱靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)左旋肉堿鹽酸鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Carnitine

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 左旋肉堿1酸鹽(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Carnitine L-tartrate

大鼠皮膚肥大細胞*培養(yǎng)基 100mL化(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRLead (II) iodide
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄樹脂，英文名或英文縮寫：Merrifield resin，級別：BR，規(guī)格：10克

腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1,2,3-三錄炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) 米氏同;4，4′-四基二安基二本同;米蚩同;米氣勒氏同;四隊，隊′-二安二本同;4,4′-雙(二安基)二本同 Michlqr's kqtonq;4,4′-Bis(diMqthylcMino)bqnzophqnonq;Bis[4-(diMqthylcMino)phqnyl]Mqthcnonq 90-94-8

大鼠心肌成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL對二基聯(lián)本，英文名或英文縮寫：Benzidine，級別：CP，規(guī)格：25克

35.1雜交瘤細胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE
Tris-HCl緩沖液不同pH及摩爾濃度RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元麥芽糖;淀粉糖D-(+)-Maltose monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：>92%,一水物

人皮膚成纖維細胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細胞*培養(yǎng)基 100mLONX-0914 (PR-957)ONX0914;PR957質(zhì)量規(guī)格：>98%,immunoproteasome抑制劑

人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μgN-壬?；?/span>-N-葡萄糖胺(MEGA9)N-Nonanoyl-N-methylglucamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 纖維素(100000mPa.s)Methyl cellulose質(zhì)量規(guī)格：粘度100000mPa.s

盤羊皮膚細胞;ASHS3纖維素(4000 mPa.s)Methyl cellulose, middle viscosity質(zhì)量規(guī)格：4000mPa.s,BR

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