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    順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法

    簡要描述:順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:李斯特氏菌增菌肉湯(LEB) 英文名稱:Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g PALCAM肉湯 英文名稱:PALCAM Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g PBS緩沖液(PH7.4) 英文名稱:PBS Solution 產(chǎn)品規(guī)格:250g 7%羊血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:7%Sheep Blood Agar Ba

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-27
    • 訪  問  量:578

    詳細(xì)介紹

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對(duì)照管只需要做一管。

    3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

    對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/50樣

    檢測方法:紫外分光光度法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6596

    產(chǎn)品分類:三羧酸循環(huán)系列
    商品介紹:

    測定意義:

    順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環(huán)中的酶,催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化,在順烏頭酸酶作用下,通過脫水與加水反應(yīng),使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進(jìn)一步的氧化脫羧反應(yīng)作準(zhǔn)備。

    測定原理

    ACO催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH,導(dǎo)致340nm處光吸收上升。

    需自備的儀器和用品

    紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    25mL Tricine-SDS Sample Buffer,2X), reducing  Tricine-SDS Sample Buffer,2X), reducing  常溫保存

    100µL 小鼠抗c-Myc標(biāo)簽單抗 Anti c-Myc-Tag Mouse MAb -20℃保存

    2 ug PT2/GFP PT2/GFP 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    100mL RNase-free PVP K30溶液,20%  常溫

    2 ug pCYB 1 pCYB 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    產(chǎn)芽孢肉湯 Sporulation Broth 250g

    5g D- 核糖 D-Ribose 4℃保存

    50T 炭疽桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    100mg SMT(iNOS抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

    250mL Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA (GVBMG)   常溫保存

    10uL HRP標(biāo)記的抗抗體 Anti Biotin Ab,HRP 4℃保存

    順烏頭酸酶(ACO)測試盒紫外分光光度法Rabbit Anti-Avidin/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-Smad3(Ser204)  磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    XRCC1  X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TSPAN6  四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白) 規(guī)格: 0.2ml

    GFAP  膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    RPL19  核糖體蛋白L19抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Donkey Anti-human IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

    CEP97  中心體蛋白97kDa抗體 規(guī)格: 0.2ml

    IL-13Ra2  白細(xì)胞介素-13受體a2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    SCRO/DCUN1D1  鱗狀細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-M-CSF Receptor(Tyr546)  磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

    PPIB/Cyclophilin B  親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIB抗體 規(guī)格: 0.2ml 

     


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