UltraSYBR Mixture

儀器：
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當(dāng)時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

NCI-H460(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2L-色氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Tryptophan methyl ester

HDMEC pre-screened Pellet 人微血管內(nèi)皮細胞團塊(預(yù)選型) > 1 mio.cells 成骨細胞培養(yǎng)基ObM-prfL-酪氨酸甲酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Tyrosine methyl ester

CL-0357HHCC(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2L-半胱氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98L-Cysteine ethyl ester

VTI1A Others Human 人 VTI1A 人細胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨醇 質(zhì)量規(guī)格：>97%,油狀L-Leucinol

人腎小球內(nèi)皮細胞總RNAHRGEC NAN-Boc-L-亮氨醇 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-Leucinol
RSPO1 Others Human 人 RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧鳥苷一水合物2'-Deoxyguanosine monohydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

CSSTH1 中華鱉心肌來源細胞N2-苯氧基乙酰基鳥嘌呤N2-Phenoxyacetyl Guanine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL2'-脫氧胞苷-5'-二1酸三鈉鹽(分子生物學(xué)級)dCDP, 2'-Deoxycytidine-5'-Diphosphate,3 salt質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級

RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞DMPDMP質(zhì)量規(guī)格：BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;Mao 人骨骼肌細胞*培養(yǎng)基 100mL沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR)Dodecyl gallate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
人心房成纖維細胞 (HCFaa)( 5×105 ) hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 Human奧當(dāng)卡替(MK-0822)質(zhì)量規(guī)格：>98%,cathepsin K抑制劑Odanacatib;MK0822

人小氣道上皮細胞總RNAHSAEpiC NA4-硝基兒茶酚質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0% ，標(biāo)準(zhǔn)品4-NITROCATECHOL

BST1 Others Rat 大鼠 CD157 / BST1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-硝基兒茶酚質(zhì)量規(guī)格：>98.0% ，進口分裝4-NITROCATECHOL

人骨骼肌細胞*培養(yǎng)基 100mL曲格列酮質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTroglitazone(CS-045)

CHO-AA8細胞，轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控含EGFP基因的CHO細胞 H9c2(2-1)(大鼠心肌細胞) 615小鼠前胃癌瘤株;Fc2-氨基-4'-氟二苯甲酮質(zhì)量規(guī)格：>98%2-Amino-4'-fluorobenzophenone
UltraSYBR MixtureSELPLG Others Mouse 小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 人細胞裂解液 (陽性對照) 秦皮甲素Esculin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0927秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）Fraxetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠肝細胞;IAR20 腎透明細胞腺癌細胞，786-O[786-0]細胞 P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞，小鼠骨髓瘤細胞秦皮乙素（標(biāo)準(zhǔn)品）6,7-Dihydroxycoumarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Ishikawa, 人內(nèi)膜癌細胞系 Human秦皮乙素；6,7-二羥基；七葉亭6,7-Dihydroxycoumarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%

AGER Others Mouse 小鼠 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) 茄尼醇Solanesol質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

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