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簡(jiǎn)要描述:總巰基測(cè)試盒微量法phospho-p23 (Ser113) 磷酸化端粒結(jié)合蛋白P23抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat anti-Gpig IgG whole serum 羊抗豚鼠IgG抗清 規(guī)格: 1mlCST8/Cystatin 8 胱抑素8/半胱蛋白抑制劑8抗體 規(guī)格: 0.2mlMTP18 線粒體蛋白18抗體 規(guī)格: 0.2mlProfilin 2 前纖維蛋白2抗體 規(guī)格:
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:總巰基測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6452
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 生物體內(nèi)巰基主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對(duì)于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測(cè)定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測(cè)定蛋白質(zhì)巰基含量。 測(cè)定原理: 巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 天平、研缽、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2 ug pCAMBIA1303 pCAMBIA1303 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3%nacl賴脫羧 Sodium chloride lysine decarboxylase test medium 20支
5g L- 羥基 L-Hydroxyproline 室溫干燥保存
50T 口蹄疫病毒亞洲1型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100 mL PRMI1640培養(yǎng)基 Cell Culture Medium -20℃保存
接種測(cè)試微生物瓊脂培養(yǎng)基 Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism) 250g
100mL RNA電泳液,10× RNARUN Buffer, 10× 常溫
2 ug pGBKT7 pGBKT7 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
含TSA培養(yǎng)基平板 7cm/個(gè)*10
1瓶 EJ細(xì)胞株 EJ 低溫運(yùn)輸和保存
孟加拉紅培養(yǎng)基平板(9cm) Rose Bengal Medium 10個(gè)/包
總巰基測(cè)試盒微量法phospho-p23 (Ser113) 磷酸化端粒結(jié)合蛋白P23抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat anti-Gpig IgG whole serum 羊抗豚鼠IgG抗清 規(guī)格: 1ml
CST8/Cystatin 8 胱抑素8/半胱蛋白抑制劑8抗體 規(guī)格: 0.2mlMTP18 線粒體蛋白18抗體 規(guī)格: 0.2ml
Profilin 2 前纖維蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1mlXAB2/SYF1 XAB2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
ARSH 芳香基硫酸酯H抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-CHK2 (ser33) 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Avidin/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml
APLP1 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgM/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
Menin/Men1 Menin抑蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlSDHA 琥珀酸脫復(fù)合體亞基A抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Bio 標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.3mlPRSS3 腦胰蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cathepsin Z 組織蛋白z抗體 規(guī)格: 0.1mlEntactin/Nidogen 巢蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
C19orf18 19號(hào)染色體開放閱讀框18抗體 規(guī)格: 0.2mlPP2Ac/PP4C 磷酸酯
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