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    單寧酶(TAN)測(cè)試盒微量法

    簡(jiǎn)要描述:單寧酶(TAN)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:SS瓊脂 英文名稱:Salmonella Shigella Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 亞利桑那菌瓊脂(SA) 英文名稱:Salmonella Arizona Agar 產(chǎn)品規(guī)格:100 氯化鎂孔雀綠肉湯(MM) 英文名稱:Rappaport-Vassiliadis Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g HE瓊脂(HE) 英文名稱:Hektoen En

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-28
    • 訪  問(wèn)  量:453

    詳細(xì)介紹

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測(cè)定。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

    產(chǎn)品名稱:單寧酶(TAN)測(cè)試盒微量法

    產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

    檢測(cè)方法:微量法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6458

    產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(TannaseEC 3.1.1.20),它可以水解沒(méi)食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒(méi)食子酸和葡萄糖。

    測(cè)定原理:

    使用抗氧化劑沒(méi)食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物,在270nn下測(cè)定底物PG反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。

    需自備的儀器和用品:

    紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

    QQ截圖20220307153537.png 

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對(duì)照管只需要做一管。

    3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

    對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

    1g  Heparin Sodium Salt  4℃避光保存

    50T 副溶血性弧菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    100mL 一管式TMB顯色液B (沉淀型)  One-Tube TMB Chromogenic Solution 2-8℃避光保存

    2 ug SuperCos 1 SuperCos 1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    1套 硅膠膜DNA離心吸附柱(大提) Silica Spin Column Maxiprep 常溫

    2 ug pAcGFP1-1 pAcGFP1-1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板(9cm) Nutrient Agar 10個(gè)/包

    1瓶 Bel-7402/FU細(xì)胞株 Bel-7402/FU 低溫運(yùn)輸和保存

    Half-Fraser培養(yǎng)基顆粒 Half-Fraser Medium 225ml/袋*10

    1000U p19 siRNA 結(jié)合蛋白  p19 siRNA Binding Protein -20℃保存

    250mL NP40 Lysis Buffer,Low Salt(低鹽型NP40裂解液) NP40 Lysis Buffer,Low Salt 常溫保存

    單寧酶(TAN)測(cè)試盒微量法PNPO  磷酸吡哆醇氧化抗體 規(guī)格: 0.2mlSLAMF9  CD2F-10抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-MAP1LC3A(Ser12)  磷酸化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Bio  標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

    Retinoic acid induced 17  維甲酸誘導(dǎo)蛋白17抗體 規(guī)格: 0.2mlCYP46  24S-羥化 規(guī)格: 0.2ml

    FLAG Tag(CT)  FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端) 規(guī)格: 0.1mlphospho-ATM(Ser1981)  磷酸化毛細(xì)管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TEM7R/Plxdc2  瘤管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MAPKAPK2 (Thr222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-ATG3 (Tyr18)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlC11orf73  11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框73抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-TAK1(Thr187)  磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激1 規(guī)格: 0.1mlCOLEC11  凝集蛋白家族11抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Nogo-A  軸索過(guò)度生抑制因子-A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FHIT (Tyr114)  磷酸化脆性組三聯(lián)體抗體 規(guī)格: 0.1ml

    BRLF1  立即早期基因BRLF1抗體(鼻咽基因) 0.2mlPhospho-HP1 gamma (Ser93)  磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TSARG4  生細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體 規(guī)格: 0.1mlDUX3  DUX3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    MARCH8  膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlPKA gamma  蛋白激Aγ抗體 規(guī)格: 0.2ml

    MDGA2  神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlKCNA5  鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體 規(guī)格: 0.2ml 

     


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