單寧酶（TAN）測(cè)試盒紫外分光光度法

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招：

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照，與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求：

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長(zhǎng)期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

商品介紹：

試劑組成和配制:

提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

操作步驟：

1. 樣品的準(zhǔn)備：

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：收集細(xì)胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備：動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒（P1511）測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定，可以冰浴保存；如果當(dāng)天不能完成測(cè)定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作：

a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存，可當(dāng)天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備：需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升，參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品，但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

5ug lambda（λ） DNA（普通） Lambda DNA（λ DNA） -20℃保存

2 ug pNZ8148 pNZ8148 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

蛋白胨（250g） Peptone 250g

1瓶 SW1353細(xì)胞株 SW1353 低溫運(yùn)輸和保存

40%尿素水 40%Urea Water 5ml/支*10

5g 乙二醇雙 (2- 氨基乙基 ) 四乙酸 (EGTA) EGTA 室溫保存

50T 惡性瘧PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存

2 ug SB-T11-2A EGFP SB-T11-2A EGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100g 固相內(nèi)毒素清除劑 Surface Endotoxin Erasol 常溫

2 ug pTYB 11 pTYB 11 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

單寧酶（TAN）測(cè)試盒紫外分光光度法Goat Anti-Bovine IgG/PE  PE標(biāo)記的羊抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlCIDEB  促進(jìn)凋亡基因抗體 規(guī)格: 0.2ml

prox1  prox-1抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

RFPL4A/RNF210  環(huán)指蛋白210抗體 規(guī)格: 0.2mlDAPK2  凋亡相關(guān)蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-mTOR (Tyr144)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-ATF2(Ser472)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ERK1/MAPK3  絲裂原活化蛋白激3抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-MEF2A(Thr319)  磷酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml

SERPIN A11  絲蛋白抑制劑A11抗體 規(guī)格: 0.2mlGDF9  生分化因子9抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.3mlphospho-AKT1(Thr34)  磷酸化蛋白激B抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL13/MCP-4  單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlCBX1/HP1 β  異染色體同源蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CNR1/CB1  鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

URG4  上調(diào)基因4抗體(N端) 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266)  磷酸化絲裂原活化蛋白激3K9抗體 規(guī)格: 0.1ml