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簡要描述:超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:葡萄糖銨培養(yǎng)基 英文名稱:Ammonium Dextrose Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 葡萄糖半固體培養(yǎng)基 英文名稱:Dextrose Semisolid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 動力--尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU) 英文名稱:Motility Indol Urea Medium Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g SIM培養(yǎng)基 英
詳細(xì)介紹
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6461 |
商品介紹:
測定意義: 超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。 測定原理: AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。 自備實驗用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
50T 彈狀病毒PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
30次 銀染清除劑 Silver Stain Erasol 常溫保存
2 ug SD1211-chip-Ctr SD1211-chip-Ctr 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1次 96孔板質(zhì)粒DNAout(真空法)
2 ug pET-41b(+) pET-41b(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
葡萄糖發(fā)酵管(軍團(tuán)菌) 20支
2 ug pED-DsbA-pp-air pED-DsbA-pp-air 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
20個 雜交袋 Hybridization Bag 常溫
10次 一管式點(diǎn)突變試劑盒 One-Tube Mutagenesis Kit -20℃保存
100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5 MOPS Buffer,0.5M,pH6.5 常溫保存
100次 古細(xì)菌+真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 3(rDNA) Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法BRMS-1 轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml
VMAT2 腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Syntrophins/SNTA1/Syntrophin Alpha1 神經(jīng)肌肉接蛋白SNTA1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-SMC1(Ser957) 磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HEY2 轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC40 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 規(guī)格: 0.2ml
NIPP1/ARD1 核抑制蛋酸1抗體 規(guī)格: 0.2ml
RNF122 環(huán)指蛋白122抗體 規(guī)格: 0.2ml
CKLFSF2 isoform 1 趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體 0.2ml
TRIP 瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
C4orf22 4號染色體開放閱讀框22抗體 規(guī)格: 0.2ml
p53 (FL-393) 瘤抑制基因p53抗體 規(guī)格: 0.2ml
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