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    非蛋白質(zhì)巰基測試盒微量法

    簡要描述:非蛋白質(zhì)巰基測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:乳糖肉湯 英文名稱:Lactose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 煌綠瓊脂 英文名稱:Brilliant Green Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂 英文名稱:Desoxycholate Citrate Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 培養(yǎng)基(蛋白胨水) 英文名稱:Indole Medium 產(chǎn)品規(guī)格:10g

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時(shí)間:2023-12-28
    • 訪  問  量:429

    詳細(xì)介紹

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:非蛋白質(zhì)巰基測試盒微量法

    產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

    檢測方法:微量法

    產(chǎn)品貨號:BK-01S6462

    產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
    商品介紹:

    測定意義:

    生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。

    測定原理:

    巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代--硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。

    自備實(shí)驗(yàn)用品:

    天平、研缽、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水,甲醇。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    2 ug pMD18 pMD18 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    脫脂奶蔗糖胰蛋白胨瓊脂 SkimMilkSucroseCaseinDigest Agar Medium 250g

    1瓶 TM3細(xì)胞株 TM3 低溫運(yùn)輸和保存

    7.5%氯化鈉肉湯 7.5% Sodium Chloride Broth 250g

    1瓶 NCI-H1650細(xì)胞株 NCI-H1650 低溫運(yùn)輸和保存

    50T 大腸桿菌(O157:H7)PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    30次 低pH 緩沖液套裝 Low pH Buffer Set 常溫保存(5×低pH上樣液需要-20℃保存)

    2 ug pYFPlac112 pYFPlac112 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    5次 97孔板病毒DNAout(離心法) 96 Microwell Plate Viral DNAOUT 常溫

    2 ug pET-27b(+) pET-27b(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基  

    非蛋白質(zhì)巰基測試盒微量法ER β  雌激素受體β抗體 規(guī)格: 0.1ml

    PVRL1/CD111/Nectin1  受體相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    TCF7L2  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1ml

    Prostaglandin E Receptor EP2  前列素E2受體2抗體 規(guī)格: 0.2ml

    TSBP  睪特異蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-RelB(Ser552)  磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Cytochrome B/MT-CYB  細(xì)胞色素B抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-c-Jun (Ser73)  磷酸化原基因c-Jun抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit anti-MG IgG/Bio  標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

    LZTS1  假定瘤抑制亮拉鏈蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml 

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

     


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