花青素還原酶（ANR）測試盒微量法

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：花青素還原酶（ANR）測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

產(chǎn)品貨號：BK-01S6466

產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液（BGB） Brilliant Green Lactose Bile Broth 250g

1瓶 MEF細(xì)胞株 MEF 低溫運(yùn)輸和保存

MI培養(yǎng)基 MI Medium 1000ml

5g 腺硫酸鹽 Adenine Sulfate 避光保存

100mL TEA Buffer,0.2M,pH7.0   TEA Buffer,0.2M,pH7.0   常溫保存

10g 甜菜堿 Betaine 4℃保存

2 ug pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin pGCsi/H1/Neo/GFP Survivin 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

抗生素檢定培養(yǎng)基6號 Antibiotic Agar NO.6 250g

1瓶 Dami細(xì)胞株 Dami 低溫運(yùn)輸和保存

含接觸皿培養(yǎng)基平板（5.5cm） Contact Plate Medium 10個(gè)/包

1000U 大腸桿菌DNA連接（E.coli Ligase） E. coli DNA Ligase -20℃保存

花青素還原酶（ANR）測試盒微量法PMP2  周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlMAL/MPV17  T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRKAA2(Ser173)  苷單磷酸活化蛋白激α2抗體 規(guī)格: 0.1mlMARCH1  膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

L-Citrulline  L-瓜抗體 規(guī)格: 0.2mgABHD13  水解結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml

FAST kinase  Fas活化的絲/蘇激抗體 規(guī)格: 0.1mlUBE2A/UBE2B/RAD6  泛素結(jié)合E2蛋白A抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-LSP1 (Ser252)  磷酸化白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlHIF3 alpha  缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體 規(guī)格: 0.1ml

CT DNA(calf thymus DNA)  小牛胸DNA抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

FRMD5  FRMD5蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

NOX2/gp91phox  NADPH氧化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

FLAG Tag (NT)  FLAG Tag標(biāo)簽抗體（N端） 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444)  磷酸化核糖體S6蛋白激抗體 規(guī)格: 0.1ml