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    超氧陰離子測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

    簡(jiǎn)要描述:超氧陰離子測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:革蘭氏陰性菌增菌液 英文名稱(chēng):Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2液體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Coliphage MS2 Liquid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 大腸桿菌噬菌體MS2半固體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Coliphage MS2 Medium(Semisoli

    • 產(chǎn)品型號(hào):
    • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
    • 更新時(shí)間:2023-12-28
    • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:438

    詳細(xì)介紹

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

    產(chǎn)品名稱(chēng):超氧陰離子測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

    產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

    檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

    產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6432

    產(chǎn)品分類(lèi):氧化與抗氧化系列
    商品介紹:

    測(cè)定意義:

    生物體內(nèi)超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號(hào)傳導(dǎo)的作用,但積累過(guò)多時(shí)會(huì)對(duì)細(xì)胞膜及生物大分子產(chǎn)生破壞作用,導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。

    測(cè)定原理:

    超氧陰離子與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2-,NO2-在對(duì)氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據(jù)A530值可以計(jì)算樣品中O2-含量。

    自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

    天平、水浴鍋、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、氯仿和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

    建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測(cè)定。

    10次 百萬(wàn)堿基級(jí)動(dòng)物DNAout  

    2 ug pECFP-MEM pECFP-MEM 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    改良鹽緩沖液PSB Phosphate Saline Buffer,Modified 250g

    100g 可溶性淀粉 Starch Soluble 室溫干燥保存

    50T 玉米BT11/MS PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    100mL Percoll 2.0  

    125mL HEPES Lysis Buffer with Triton,2X HEPES Lysis Buffer with Triton,2X 常溫保存

    0.3mL 可逆型Taq DNA聚合抑制劑 Taq DNA Polymerase Inhibitor -20℃保存

    2 ug pLNCX2 pLNCX2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    Slanetz和Bartley培養(yǎng)基 Slanetz And Bartley Medium 250g

    1瓶 NAMALWA細(xì)胞株 NAMALWA 低溫運(yùn)輸和保存

    超氧陰離子測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Phospho-Mst1(Thr183)  磷酸化蛋白激MST1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    PLEKHM1  石骨癥相關(guān)蛋白PLEKHM1抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Annexin A1  膜粘連蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    mTOR/FRAP  雷帕霉素靶蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    C12ORF54  12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ZNF217  鋅指脂蛋白217抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-PIK3C3(Ser282)  磷酸化磷脂酰肌醇激3催化亞單位3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-ITGB3(Tyr785)  磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    CANX/Calnexin  鈣連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-dog IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.5ml

    BIRC5/Survivin variant  細(xì)胞凋亡抑制因子5抗體 規(guī)格: 0.2ml

    C5orf35  5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框35抗體 規(guī)格: 0.2ml 

    注意事項(xiàng):

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

    2、對(duì)照管只需要做一管。

    3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

    對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

     


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