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    脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法

    簡要描述:脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:乳糖莫能葡萄糖醛酸瓊脂 英文名稱:LMG Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g Tergitol-7瓊脂 英文名稱:Tergitol-7 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g A1培養(yǎng)基 英文名稱:A1 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g LesEndo瓊脂 英文名稱:m-Endo Agar,LES 產(chǎn)品規(guī)格:250g

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-28
    • 訪  問  量:646

    詳細(xì)介紹

    實驗結(jié)果判斷我有妙招:

    1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

    2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

    3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

    4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

    與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

    ① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

    ② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

    ③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

    ④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

    ⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

    本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    檢測方法

    貨號

    脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法

    100管/96樣

    微量法

    BK-01S6411

    商品介紹:

    測定意義:

    脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。

    測定原理:

    LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。

    需自備的儀器和用品:

    分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    試劑組成和配制:

    提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

    試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

    試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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    操作步驟:

    1. 樣品的準(zhǔn)備:

    a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

    b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

    d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

    e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

    2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

    a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

    b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

    c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

    250mL Maleate Buffer(馬來酸緩沖液),0.2M,pH7.0  Maleate Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

    25OD 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

    2 ug pMelBac B pMelBac B 低溫運輸,-20℃保存

    0.1mL×10 Origami B(DE3) plysS感受態(tài)細(xì)胞  Origami B (DE3) plysS Competent Cell -80℃保存

    25g 多聚甲醛 Paraformaldehyde 密封干燥保存

    50T 人FGFR3 1138G/A多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)  低溫運輸,-20℃保存

    25 mg TMRE Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

    500mL Carbonate Buffered Saline(鹽緩沖鹽水),5X,pH9.5  Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.5  常溫保存

    10mL 電泳級溴藍(lán)溶液 Bromophenol Blue Solution,EG 常溫避光干燥保存

    2 ug pHANNIBAL pHANNIBAL 低溫運輸,-20℃保存

    沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(EP) Sabouraud-dextrose Broth 250g

    脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法Cyclooxygenase 1/COX1  前列素氧化環(huán)化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml

    Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-chicken IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

    C3orf24  3號染色體開放閱讀框24抗體 規(guī)格: 0.2ml

    BOLA1  BOLA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ARTS  凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體 規(guī)格: 0.2ml

    phospho-A Raf(Ser214)  磷酸化A-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

    BRMS1  轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MuRF1/Trim63  肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    SPINK1/SPINK3  瘤相關(guān)胰蛋白抑制劑1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    MARCH7/Axotrophin  膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml

     


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