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簡要描述:脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:m-TEC瓊脂 英文名稱:m-TEC Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 現(xiàn)隱肉湯 英文名稱:Presence Absence Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 心浸液瓊脂 英文名稱:Heart Infusion Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 桔汁瓊脂 英文名稱:Orange Serum Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
詳細(xì)介紹
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6412
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: 脂質(zhì)過氧化是動植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。 測定原理: LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。 需自備的儀器和用品: 分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
1瓶 HSC-T6細(xì)胞株 HSC-T6 低溫運輸和保存
Stuart運送培養(yǎng)基管 Stuart Transport Medium 20支/包
100mL Western印跡膜封膜液 (NC膜和PVDF膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
2 ug SD1211- 4 SD1211- 4 低溫運輸,-20℃保存
32次 終點顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒 Chromogenic End-point TAL Kit 4℃避光保存
2 ug pFP93 pFP93 低溫運輸,-20℃保存
即用型無菌瓶裝液體培養(yǎng)基
1瓶 AtT-20 [AtT20]細(xì)胞株 AtT-20 [AtT20] 低溫運輸和保存
改良馬丁培養(yǎng)基顆粒 Martin Medium, Modified 300ml/袋*10
10次 5'-RACE試劑盒 5'-RACE Kit -20℃保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒可見分光光度法ATX2 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
LASS6 壽相關(guān)基因lASS6抗體 規(guī)格: 0.2ml
CSP 環(huán)子孢子蛋白(約氏)抗體 規(guī)格: 1ml
C1orf67/DNAH14 1號染色體開放閱讀框67抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRP1/gp75 酪相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-P53(Ser376) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml
GFOD2 葡萄糖果糖還原2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
C1orf103 1號染色體開放閱讀框103抗體 規(guī)格: 0.2ml
BNIP3 促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
SAMDC S-苷蛋脫羧抗體 規(guī)格: 0.1ml
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