Na+K+-ATPase / Ca2+Mg2+-ATPase

儀器：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
紅細(xì)胞：需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測(cè)定方法進(jìn)行提取后測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說明書。

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測(cè)定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則：

人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)1品紅，英文名或英文縮寫：Carbol fuchsin，級(jí)別：FMP，84%，規(guī)格：1克

SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) R(-)N(3，5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-

CM-H030人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM 10767-8-

MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 肝癌細(xì)胞,CBRH-7919細(xì)胞 TT(人骨髓樣甲狀腺癌細(xì)胞)銀杏葉提取物，英文名或英文縮寫：Ginkgo biloba，級(jí)別：CP，24.7%，規(guī)格：25克

正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL2，4-二錄，英文名或英文縮寫：2,4-DCAD，級(jí)別：特，98%，規(guī)格：500克

TE-1人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,4’-聯(lián)本二加醋 Biphqnyl-4,4'-diccrboxylic ccid 787-70-

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)3--2-本并噻唑酮腙鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：MBTH xy7nochloride，級(jí)別：CP，98%，規(guī)格：250克

人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse異煙酸shēng huà shì jì容量：2KU

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1(胃蛋白酶抑制劑)
FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬細(xì)胞MMa頭孢他啶-d5Ceftazidime-d5質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Δ2-頭孢他啶Δ2-Ceftazidime質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

YES1 Others Human 人 c-Yes / YES1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 頭孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK頭孢唑啉Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

KG-1細(xì)胞，白血病細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,Hep3B2.1-7細(xì)胞 CL-0032BEL-7404(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡Fluticasone 17β-Carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
Na+K+-ATPase / Ca2+Mg2+-ATPaseTE-1人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS依西美坦質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,Aromatase inhibitorExemestane (USP)

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標(biāo)簽)依西美坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Exemestane

人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=3%Aramite solution

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1莎稗1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%Anilofos

ERBB3 Others Mouse 小鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) Amberlite® IRA410 離子交換樹脂(719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂)質(zhì)量規(guī)格：719(202)是高等級(jí)凝膠強(qiáng)堿Ⅱ型陰離子交換樹脂Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin

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