甲醛脫氫酶（FDH）測試盒微量法

商品介紹：

提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

實驗結(jié)果判斷我有妙招：

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟：

1. 樣品的準備：

a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作：

a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

3%氯化鈉堿性蛋白胨水 3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包

50mg D- 氨基酸氧化 D-Amino Acid Oxidase 4℃保存

250mL RNase-Free SSPE（無RNase的SSPE）,20X,pH7.4   RNase-Free SSPE,20X,pH7.4   常溫保存

1 管 JM1腸桿菌 JM110 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNA-H1.1/Adeno pRNA-H1.1/Adeno 低溫運輸，-20℃保存

100mL 動物RNAout (TRIzol)  Animal RNAOUT（TRIzol） 4℃保存

2 ug pcDNA3.1/Zeo（+） pcDNA3.1/Zeo（+） 低溫運輸，-20℃保存

100次 動物種屬鑒定PCR Mix 2（16S rDNA) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

5g 甲基橙 Methyl Orange 室溫干燥保存

50T 牛海綿狀腦病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

12x50nm Cyanine 3-NHS Ester Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

甲醛脫氫酶（FDH）測試盒微量法EBNA1/EBV Nuclear Antigen  EB毒核抗原1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TPD54/TPD52L2  瘤蛋白D54蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PDGF AB+BB  小板源性生因子AB+BB抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRIM17/RNF16  環(huán)指蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlGlutaminase  谷抗體 0.2ml

PTEN/MMAC1(NT)  一種瘤抑制基因抗體（N端） 規(guī)格: 0.1mlTubulin-beta  微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）Tubulinβ 規(guī)格: 0.1ml

M2-PK (pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激-M2 規(guī)格: 0.1mlCDX2/3  尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHL22  Kelch樣蛋白22抗體 規(guī)格: 0.2mlKLK2  激肽釋放2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.1mlCXCL16  CXC趨化因子16抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cecropin monoclonal  殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體 規(guī)格: 1mlABH8/ALKBH8  AlkB同源蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

LIPK  脂肪家庭成員K抗體 規(guī)格: 0.2mlPerilipin A  脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 規(guī)格: 0.1ml

TLR11  Toll樣受體11抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-GRB10 (Tyr67)  磷酸化生因子受體結(jié)合蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml

Sigma1R  衰老相關(guān)基因8蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/Gold  膠體金標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.5ml