NAD激酶（NADK）測試盒可見分光光度法

簡要描述：NAD激酶（NADK）測試盒可見分光光度法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產品：GN增菌液顆粒英文名稱：Gram Negative Enrichment Broth 產品規(guī)格：250g 氯化鈉蛋白胨緩沖液顆粒英文名稱：Buffered Sodium Chloride Peptone Solution 產品規(guī)格：250g MLCB寒天培地顆粒英文名稱：MLCB Agar 產品規(guī)格：250g 胰酪大豆胨

產品型號：
廠商性質：經銷商
更新時間：2023-12-29
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產品分類

生化檢測試劑盒

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詳細介紹

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：NAD激酶（NADK）測試盒可見分光光度法

產品規(guī)格：50管/24樣

檢測方法：可見分光光度法

產品貨號：BK-01S6324

產品分類：輔酶Ⅰ系列
商品介紹：

測定意義

測定意義:

NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是目前所發(fā)現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理：

NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT），通過在600 nm下測定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pGenesil- 2 pGenesil- 2 低溫運輸，-20℃保存

0.5%葡萄糖肉湯瓊脂 250g

1瓶 Hepa1-6細胞株 Hepa1-6 低溫運輸和保存

含225ml 3%氯化鈉堿性蛋白胨水均質袋 3% NaCl Alkaline Peptone Water 10個/包

1.5mL RNase A溶液，10 mg/mL RNase A Solution 4℃（短期）或-20℃（長期）保存

50mL Potassium Chloride Solution（溶液）,5M Potassium Chloride Solution,5M 常溫保存

1g 硫酸卡那干粉 Kanamycin Sulfate Powder 4℃避光保存

2 ug pProEX-c pProEX-c 低溫運輸，-20℃保存

糖發(fā)酵基礎肉湯 Bromcresol Purple Broth Base 250g

5g 瑞氏色素 Wright Stain 室溫保存

50T 轉基因植物Sad1基因PCR檢測試劑盒低溫運輸，-20℃保存

NAD激酶（NADK）測試盒可見分光光度法Phospho-cdc2 (Tyr15) 磷酸化周期素依賴激2抗體規(guī)格: 0.1mlCKLFSF7/CMTM7 趨化素樣因子超家族成員7抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-rat IgG/Gold 膠體金標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.5mlATP7B 銅轉運蛋白質β鏈抗體規(guī)格: 0.1ml

VSIG4 T淋巴細胞負調節(jié)蛋白抗體規(guī)格: 0.1mlTTF-2 甲狀轉錄因子-2抗體規(guī)格: 0.2ml

IL-31 白細胞介素31抗體規(guī)格: 0.2mlHDBP2/PTTG1IP 瘤毒調控因子1抗體（鋅指蛋白395）規(guī)格: 0.2ml

CKLF 趨化素樣蛋白抗體規(guī)格: 0.2mlCyclin M2/CNNM2 周期素M2抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Biotin/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1mlAdducin protein 內收蛋白抗體 0.1ml

FAM55D FAM55D蛋白抗體規(guī)格: 0.2mlRNF70 環(huán)指蛋白70抗體規(guī)格: 0.2ml

NF66/alpha Internexin α-中連蛋白抗體規(guī)格: 0.2mlSTK3 絲/蘇蛋白激3抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Histone H3 (Thr3) 磷酸化組蛋白H3抗體規(guī)格: 0.1mlGAPDH(3E12)-Loading Control 3-磷酸甘油醛脫單克隆抗體(內參抗體) 0.1ml

Dog IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗犬IgM抗體規(guī)格: 0.1ml

ZNF828/C13orf8 鋅指蛋白828抗體規(guī)格: 0.2ml

CHRNA4 堿型乙酰受體α4抗體規(guī)格: 0.1ml

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