當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > RNA/DNA提取試劑盒 > RNase-free Lithium Chloride Solution
簡要描述:RNase-free Lithium Chloride Solution及公司相關(guān)產(chǎn)品十四酸異丙酯,英文名或英文縮寫:IPM,級別:高純,98%,規(guī)格:1公斤 豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA KitL-乳酸脫氫酶(+4℃)NA HumanCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit
產(chǎn)品分類
詳細(xì)介紹
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱:RNase-free Lithium Chloride Solution
產(chǎn)品規(guī)格: 詳見說明
產(chǎn)品貨號:BK-P96498
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點:
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
定量濾紙100毫克保存:-20℃ 小鼠癌胚抗原(CEA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))Dimidium Bromide質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(N) 牛雙氫(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 人酪酸激酶2(Tyk-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7-(二甲基氨基)-4-甲基(>95.0%(GC)(T))7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T) 英文名稱HumancalcitoningenerelatedpeptideELISAKit人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)規(guī)格:96T/48T 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 Mouse Coicosterone,CO ELISA Kit
氯化銀(>99%,BC)Silver chloride質(zhì)量規(guī)格:>99%,BC 調(diào)料乙醇比色法定量檢測試劑盒20 周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 ,英文名: CDK5 ELISA Kit
偏釩酸銀(>98%,BR)Silver metavanadate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISA試劑盒大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Humani-iodothyronine,T3ELISA試劑盒人狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去-4-氟代芐基莫沙必利Des-4-fluorobenzyl Mosapride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 人波形蛋白(VIM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
8-(4-氯化基硫代)腺嘌呤8-(4-Chlorophenylthio)adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2 豚鼠白介素8(IL-8)試劑盒 Guinea pig Ierleukin 8,IL-8 ELISA Kit
β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸鈉鹽水合物β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP aibody)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP aibody ELISA Kit
腺嘌呤鹽酸鹽Adenine 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口 小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 ,英文名: Collagenase I ELISA Kit MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA試劑盒小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
RNase-free Lithium Chloride SolutionS-(+)-2-基-4-甲基-1-,英文名或英文縮寫:L-Leucinol,級別:BR,98%,規(guī)格:5克 人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)免疫試劑盒 Human TALLA-1 ELISA Kit
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