水牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法

產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱：水牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法 
產(chǎn)品規(guī)格： 48T  0.2PCR管
產(chǎn)品貨號：BK-P97233
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品特點：
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶，反應特異性高，*程度地避免了非特異擴增；
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應重復性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記：
TaqMan法
TaqMan探針的特性：
（1）5′端標記有報告基團（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標記有熒光淬滅基團 （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標定量：
內(nèi)標（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸質量規(guī)格：美國進口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide  RatApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)試劑盒 Rat type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit

格列齊特-d4質量規(guī)格：美國進口Gliclazide-d4  小鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒 ，英文名
甲霜靈標準溶液(10μg/ml,u=6%)Metalaxyl solution質量規(guī)格：10μg/ml,u=6%  Mousemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒小鼠髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒 ，英文名： HO-1 ELISA Kit

氯草定(標準品)Nitrapyrin質量規(guī)格：分析標準品  小鼠皮質醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  MouseCyclin-D1ELISA試劑盒小鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

毒晰外泌肽4Exendin 4質量規(guī)格：>95%,BR  Rat hexokinase (HK) ELISA Kit 大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒  ELISAKit6-keto-PGF1a小鼠6同前列腺素F1a規(guī)格：48T/96T

血纖肽B，人Fibrinopeptide B, human質量規(guī)格：>95%,BR  Humanai-Histoneaibody,AHAELISAKit 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  ChickenIerleukin6,IL-6ELISAKit雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小梁網(wǎng)細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)水楊酸鈉10克

MCF7B細胞，人癌細胞 人癌Tamoxifen耐藥株,LCC2細胞 脂肪細胞生長添加物PAGS2,3-二溴 2,3-DibroMopyridinq 13234-89-9

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4羥高鐵血紅素50毫克

IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細胞裂解液 (陽性對照) SCHAEDLER瓊脂25克RT

卵巢上皮細胞培養(yǎng)基OEpiCM-prf94-96-22-乙基-1,3-己二醇;2-乙基-3-丙基-1,3-2-etxyl-1,3-hexanediol;Ethohexadiol;Octylene glycol;Rutgers 612
水牛源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法CADM3 Others Mouse 小鼠 CADM3 / IGSF4B / NECL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 3’-單1酸鈉鹽質量規(guī)格：美國進口Adenosine 3'-monophosphate  salt

腎皮層上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)腺苷 3',5'-二1酸鈉鹽質量規(guī)格：美國進口Adenosine 3',5'-diphosphate  salt

NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。