當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測(cè)PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
簡(jiǎn)要描述:寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;V79知母皂苷BII(標(biāo)準(zhǔn)品)Timosaponin BII質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品H1299細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-7細(xì)胞 CM-M058小鼠膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL2',3'-二脫氧鳥(niǎo)苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分SH-
產(chǎn)品分類(lèi)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品僅用于科研原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng):寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P97039
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
乙醇脫氫酶 ADA, Alcohol dehydrogenase 簡(jiǎn)介:50%的甘油溶液。50%的甘油溶液中包含酵母菌,每分子含有四個(gè)緊密結(jié)合的鋅原子。乙醇脫氫酶氧化乙醇的最適pH為8.6-9.0,還原乙醛的pH接近7.0。在25°C、pH=8.8時(shí),一單位乙醇脫氫酶每分鐘還原一微摩爾NAD。 用途及描述:科研試劑。
中性蛋白酶 Neutral Protease from Bacillus polymyxaIts 物理性狀及指標(biāo): 外觀:……………………凍干粉
蛋白及衍生物 蛋白及衍生物
鏈霉親和素 Streptavidin from Streptomyces avidinii 分子式: 分子量:
硫酸軟骨素B鈉 Dermatan Sulfate Sodium Salt 分子式: 分子量:
卵清蛋白;雞蛋白蛋白 Ovalbumin/Egg albumins 物理性狀及指標(biāo): 外觀:……………………類(lèi)白色或淡黃色冷凍干燥粉末或無(wú)定形塊狀,鱗片狀
牛IgG干粉,牛免疫球蛋白 IgG from bovine serum 動(dòng)物血清中免疫球蛋白(IgG)廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、分子生物學(xué)及醫(yī)學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)研究領(lǐng)域,既可作為大分子球蛋白用于生物化學(xué)的研究,也可以作為抗原用于免疫學(xué)和醫(yī)學(xué)研究。 公司采用親和層析純化的方法,純化得到各種高純度的IgG,純度在90%以上。
牛血紅蛋白 Hemoglobin 簡(jiǎn)介:它是一種蛋白酶的底物,來(lái)源于反復(fù)水洗、細(xì)胞溶解和透析的牛紅細(xì)胞; 用途及描述:科研試劑。
重組螞蟥素,英文名或英文縮寫(xiě):Hirudin recombinant,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:100克 傷寒抗體(St-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: St-Ab ELISA Kit
7320-34-5焦鉀potewwium pyrophosphate Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒豬白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
環(huán)戊二烯鐵,英文名或英文縮寫(xiě):Ferrocene,級(jí)別:3N,99.9%,規(guī)格:25片 Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISA試劑盒人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雞肉浸粉 Chicken extract powder Null 250G 通用試劑 Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1ELISAKit人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-羌基-3-氧基扁桃醋 DL-4-xy7noXY-3-MqTHOXYMcNDqLIC cCID 394-0-9 人β細(xì)胞素(BTC) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒乙二安四乙酸二鉀鹽shēng huà shì jì容量:保存:-20℃5毫克 組織誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶((iNOS/NOS2/mNOS))活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
N-芴甲氧羰酰基-L-異亮酸NA Humanglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit人膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-TYROSINEANIMAL-FREEL-酪酸,非動(dòng)物源25 gm60-18-4RT 人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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