當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測(cè)PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次豬圓環(huán)病毒2型PCR試劑盒
簡(jiǎn)要描述:豬圓環(huán)病毒2型PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2銪標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml) Europium standard質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mlBI U-87細(xì)胞,膀胱癌細(xì)胞 總T細(xì)胞,OKT3細(xì)胞 大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1氟離子(F-)標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水) Fluoride standard質(zhì)量
產(chǎn)品分類(lèi)
詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱(chēng):豬圓環(huán)病毒2型PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號(hào):BK-P97063
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào);
3)客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi),探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對(duì)定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對(duì)定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
消膽胺樹(shù)脂;考來(lái)烯胺 Cholestyramine resin 分子式: 分子量:
辛弗林鹽酸鹽 Synephrine HCl 分子式:C9H13NO2.HCl 分子量:203.67
鋅原卟啉 Zinc protoporphyrin 分子式: C34H32N4O4Zn 分子量:626.03
溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 Magenta-Gal 分子式:C14H15BrClNO6 分子量:408.63
溴化亞銅(>98%,BR) Copper(I) b
堿性氧化鋁 Aluminum oxide, active 分子式:Al2O3, 分子量:101.96
焦0酸鉀 Potassium pyrophosphate, tetrabasic 分子式:K4P2O7, 分子量:330.34
鄰苯三酚,焦棓酸,焦性沒(méi)食子酸 Pyrogallol 分子式:C6H6O3 分子量:126.11
銨 L-Ammonium tartrate 分子式:C4H12N2O6 分子量:184.15
鉀鈉四水 Potassium sodium tatrate, tetrahydrate 分子式:C4H4KNaO6.4(H2O) 分子量:282.22
正辛酸乙酯shēng huà shì jì容量:100毫克 大鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)免疫試劑盒 Rat cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit
79990-15-1N-芴甲氧羰?;?/span>-D-酸FMOC-D-alanine 英文名稱(chēng)RatAGRPELISAKit大鼠Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學(xué)級(jí)5MG119942-99-3Frozen 裂解液Ⅶ-1細(xì)菌裂解液
沒(méi)食子醋兒茶速?zèng)]食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9 ELISAKitODC人鳥(niǎo)氨酸脫羧酶規(guī)格:48T/96T
L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1 小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 ,英文名: Slit2 ELISA Kit
豬圓環(huán)病毒2型PCR試劑盒一次性鞋套100U2~8℃ 英文名稱(chēng)MouseNeuroophin-3,-3ELISAkit小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3(-3)規(guī)格:96T/48T
95-68-12,4-二2,4-Dimetxyl aniline TEM電鏡石蠟切片免疫組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測(cè)試劑盒(含HRP一抗)10次
鹽酸壯觀霉素shēng huà shì jì容量:25克 RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA試劑盒兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3
產(chǎn)品咨詢(xún)
聯(lián)系我們
上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號(hào)24棟 技術(shù)支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網(wǎng)站二維碼