詳細介紹
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:土壤幾丁質酶測試盒微量法
產品規(guī)格:100管/48樣
檢測方法:微量法
產品貨號:BK-01S6868
產品分類:土壤系列
商品介紹:
測定意義: 幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中,而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。 測定原理 幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基產生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。 自備實驗用品及儀器 天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板,甲苯、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
MRS MRS Medium 250g
100m 抑制劑 Trypsin Inhibitor -20℃保存
50T 豬內源性逆轉錄病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
共100次 GSH和GSSG試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
菌種芽孢 Bacillus Bacteria Medium 250g
300次 即用型熒光定量RT-PCR試劑盒 Instant Realtime RT-PCR Kit -20℃保存
2 ug pLVX-IRES-Puro pLVX-IRES-Puro 低溫運輸,-20℃保存
ATCC:2693改良Dixon(mDixon) 250g
1瓶 OCM-1A細胞株 OCM-1A 低溫運輸和保存
胰蛋白胨膽鹽瓊脂(TBA)(ISO9038-1-2000) 250g
100mg 5-溴-4-氯-3--β-D-半乳糖苷 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-Beta-D-Galactopyranoside -20℃保存
土壤幾丁質酶測試盒微量法Donkey Anti-Goat IgG/RBITC 羅丹明標記的驢抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-c-Jun(Ser63) 磷酸化原基因c-Jun抗體 規(guī)格: 0.1ml
Gigaxonin 巨軸索神經蛋白GAN抗體 規(guī)格: 0.2ml
TSHR (CT) 促甲狀素受體抗體(C端) 規(guī)格: 0.1ml
RbAp48 視網膜母細胞瘤結合蛋白P48抗體 規(guī)格: 0.2ml
ADAM28 去整合素樣金屬蛋白28抗體 規(guī)格: 0.2ml
ADNP/NAP 活性依賴的神經保護肽抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
BNP 腦鈉素抗體 規(guī)格: 0.1ml
ABC2/C17orf71 增強蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-E2F1 (Ser337) 磷酸化轉錄因子E2F-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
GIG8/ID2 DNA結合抑制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
產品咨詢
聯系我們
上海帛科生物技術有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號24棟 技術支持:環(huán)保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網站二維碼