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    羥自由基清除能力測試盒微量法

    簡要描述:注意事項:
    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
    2、對照管只需要做一管。
    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質:經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-28
    • 訪  問  量:439

    詳細介紹

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:羥自由基清除能力測試盒微量法

    產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

    檢測方法:微量法

    產(chǎn)品貨號:BK-01S6441

    產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
    商品介紹:

    測定意義:

    羥自由基作用于體內蛋白質、核酸、脂類等生物分子,造成細胞結構和功能受損,進而導致體內代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應用。

    測定原理:

    H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產(chǎn)生羥自由基,水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應生成有色物質2,3-二羥基苯甲酸,在510nm處有最大吸收峰,加入具有清除能力的物質后,有色物質便會減少,從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。

    自備實驗用品:

    恒溫水浴鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    500g 牛肉蛋白胨 Peptone Beef 室溫保存

    50T 人黏附分子-1基因K469E多態(tài)性檢測試劑盒(PCR-RLFP)   低溫運輸,-20℃保存

    50 mg Carboxy-PTIO (一氧化氮清除劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

    250mL Citrate Buffer(檸檬酸鹽緩沖液),0.5M,pH4.5   Citrate Buffer,0.5M,pH4.5   常溫保存

    1mL 鮭魚精DNA溶液(10mg/mL) Salmon Sperm DNA Solution -20℃保存

    2 ug pHT01 pHT01 低溫運輸,-20℃保存

    100g 三 Trichloroacetic Acid 4℃保存

    2 ug pPZp-RCS2-Bar pPZp-RCS2-Bar 低溫運輸,-20℃保存

    葡萄糖半固體  20支

    2 ug pCAMBIA3301 pCAMBIA3301 低溫運輸,-20℃保存

    嗜鹽性試驗用胰胨水 Halophilic experimental medium 250g

    羥自由基清除能力測試盒微量法Lin-28B  RNA結合蛋白LIN28B抗體 規(guī)格: 0.2ml

    G protein beta 1/GNB1  G蛋白β1抗體/核苷酸結合蛋白β亞基1 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-cdc25C (Thr48)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml

    phospho-PKC beta 1/2(Thr500)  磷酸化蛋白激C β1/β2(Thr500)抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-Histone H3(Ser28)  磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格: 0.1ml

    DPPL1  磷脂酸磷酸HTPAP抗體 規(guī)格: 0.2ml

    FAM123B/AMER1  母細胞瘤X蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

    EPEC/E.coli  腸致性大腸桿菌抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)  磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml

    BTG2/TIS21  B細胞遷移基因2抗體 規(guī)格: 0.1ml

    TWIST protein  TWIST蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 

     


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